No Image

Пцр рнк вич достоверность

СОДЕРЖАНИЕ
0 просмотров
17 ноября 2019

Способ лечения болезни, вызванной вирусом иммунодефицита человека, не найден до сих пор. Зато диагностика достигла серьезных успехов. Анализ на ВИЧ, выполненный методом ПЦР, – один из вариантов выявления вируса в организме.

Суть методики ПЦР при ВИЧ

Полимеразная цепная реакция, или ПЦР, – один из современных методов диагностики ВИЧ. В его основе лежит способность нуклеиновых кислот к саморепродукции. Клетка любого живого организма включает белок и нуклеиновые кислоты:

  • РНК- рибонуклеиновую,
  • ДНК- дезоксирибонуклеиновую.

Эти макромолекулы хранят генетический код. Если концентрация вирусных клеток в крови низкая, в пробе содержатся не целые цепочки ДНК, а их отдельные «кирпичики» – нуклеотиды. Полимеразная цепная реакция выявляет даже такие «обломки» вирусных клеток. Этот анализ крови на ВИЧ позволяет получить результат на ранних сроках после возможного заражения, когда клинические первые симптомы еще не появились.

Наиболее точный результат можно получить, используя для анализа венозную кровь. Перед тем как пройти обследование, за пару дней следует отказаться от жирной пищи и алкоголя. За 2 недели прекратить прием иммуностимулирующих препаратов.

Пробу биоматериала расщепляют в медицинском лабораторном реакторе. Затем фракции обрабатывают ферментами. Реактивы объединяются с ДНК вирусной молекулы и дублируют ее. Из одной клетки получается 2, из 2-х – 4, далее 8. Число растет в геометрической прогрессии. Цепная реакция позволяет в короткий срок увеличить количество вирусного компонента и сделать его заметным для лаборантов.

Нормой является отрицательный результат анализа, который выглядит так: «ДНК вируса не обнаружено». Это и есть референсное (среднестатистическое) значение.

Преимущества и недостатки методики ПЦР при ВИЧ

Диагностика ВИЧ с помощью ПЦР имеет неоспоримые преимущества, но есть и существенные недостатки. К первым относятся:

  • Высокая точность. Крайне мала вероятность получить ложноотрицательные результаты.
  • Универсальность. Для исследования подходит не только кровь, но и другие биологические жидкости (влагалищные выделения, сперма). Слюна, моча также используются, но точность результата будет ниже. В этих средах концентрация вирусных клеток незначительна.
  • Широкий спектр анализа. Один образец биоматериала можно исследовать на несколько заболеваний.
  • Скорость выполнения. Полимеразная цепная реакция относится к срочным методам диагностики. Ответ можно узнать уже на следующий день.
  • Достоверность составляет 80 %. С помощью метода ПЦР можно обнаружить вирусные частицы, даже если их концентрация невелика. Это позволяет диагностировать заболевание на ранних стадиях и своевременно начинать терапию.
  • Ранняя диагностика ВИЧ-инфекции. Время, когда ВИЧ обнаруживают в крови при помощи ПЦР, – 10-14 дней после предполагаемого заражения. Это стандартный отрезок для диагностики вируса иммунодефицита. Антитела на этом этапе еще не обнаруживаются; метод ИФА не работает.
  • Нет возрастных ограничений. Можно проводить это тестирование ребенку с момента рождения.

Недостатки метода ПЦР при диагностике ВИЧ:

  • Более высокая стоимость в сравнении с иммуноферментным анализом 3 поколения.
  • Требуется сложное медицинское оборудование.
  • Погрешность 20% в связи с высокой чувствительностью реакции. При аутоиммунных заболеваниях, злокачественных опухолях, хронических инфекциях ПЦР может дать ложноположительный результат.

Кому проводится ПЦР

Проведение этого анализа на ВИЧ рекомендовано в следующих случаях:

  • Нужен ранний ответ для предварительного диагностирования. ПЦР помогает подтвердить или опровергнуть результаты ИФА.
  • Иммуноблоттинг дал положительный результат. Если первым проводится ПЦР анализ, то обязательно подтверждение результата методом иммунного блоттинга. Исследования дополняют друг друга. Используя сразу 2 метода, медики исключают возможность ошибок.
  • Когда позитивный ВИЧ-статус подтвержден, ПЦР помогает отследить эффективность проводимой терапии.
  • Используется для исследования донорской крови на наличие антител к ВИЧ.
  • Проводить ПЦР можно даже детям до года. Этот метод применяется, чтобы выяснить ВИЧ-статус новорожденных, мамы которых являются носительницами вируса. Тест, проведенный в первые дни жизни, покажет, произошло ли внутриутробное инфицирование. Заражение могло случиться, когда ребенок проходил по родовым путям. Положительный ВИЧ-статус, приобретенный младенцем в процессе родов, удастся выявить через 2 – 3 недели.

Сколько времени делается анализ ПЦР, и где можно сдать

Проведение анализа ПЦР на ВИЧ и расшифровка результатов не требуют много времени. Забор крови занимает 5-7 минут. В стандартном случае лаборанту достаточно 24 часов, чтобы подготовить справку. Диагностирование занимает не более 8 часов, остальное время требуется на оформление. Пациент получает отчет на следующий рабочий день. Экспресс-тестирование выполняют в течение 2 часов.

Исследования на ВИЧ указанным способом не проводят по полису ОМС. Получить эту услугу бесплатно в государственной поликлинике нельзя. Зато практически все коммерческие лаборатории обычно имеют необходимое оборудование и реагенты. Проведение анализа ПЦР часто входит в общий скрининг на ВИЧ. Цена комплексной диагностики составляет от 600 до 1000 руб.

Пройти процедуру можно анонимно. В регистратуре пациенту дают индивидуальный номер, по которому он узнает результат. Современные медицинские центры отображают все данные на своем сайте в личном кабинете клиента.

Портал о Печени

Существуют различные способы обнаружить вирус иммунодефицита, именно анализ на ВИЧ ПЦР методом заслуживает особого внимания. Он основывается на том, что находит генетический материал возбудителя. Это исключает ошибку практически гарантированно. Исторически методика планировалась как чисто научный способ, но нашла применение.

ПЦР через сколько можно сдать на ВИЧ при подозрении на заражение? Отличие как раз и заключается в оперативности, потому прописать такой анализ могут на самых ранних стадиях развития болезни. Если потенциальный больной пришел к врачу сразу же после возможного инфицирования и признаков жизнедеятельности вируса еще нет, то будет назначен именно ПЦР анализ. Он работает уже с четвертого дня присутствия вирионов в крови. Для точности рекомендуется анализ примерно на 14-й день после опасного взаимодействия.

Читайте также:  Китайские шарики для потенции фото

Какова достоверность ПЦР на ВИЧ через 2 недели? Как установлено, достоверность определения наличия вируса методом полимеразно-цепной реакции очень не вызывает сомнений. С 80-х годов прошлого столетия именно этот тест массово применяется и считается одним из точнейших, его разработчик получил Нобелевскую премию. Лауреат предвидел перспективность полимеризации уже в ту эпоху.

Происхождение анализа методом ПЦР

Датой рождения можно назвать 1983 год. Метод основан на том, чтобы вычленить фрагмент нуклеотидной цепи чужака, это может быть как рибонуклеиновая кислота так и дезоксирибонулеиновая, искусственно размножить его и исследовать. Специалист по ПЦР ДНК ВИЧ берет и размножает по принципу комплементарности, выстраивая довольно длинную цепочку, которую удобно рассмотреть и подвергнуть тестированию. ПЦР РНК ВИЧ осуществляется так же, только берется плазма или сыворотка.

Возникновение этого подхода в широкой практике явилось настоящим прорывом и позволило совершить большой шаг в вопросе помощи больным. Таким образом стало реальным помогать людям на самых ранних этапах, обнаруживать недуг еще до появления специфичных антител. С этого дня истории медицины, ВИЧ уже не является приговором.

Диагностика ВИЧ ПЦР

Для исследования методом полимеразно-цепных реакций надо взять совсем немного инфекционного материала, потому поставить диагноз можно быстро и безотлагательно.

Диагностика ВИЧ ПЦР точна, требует виртуозного уровня квалификации от работников, которые занимаются исследованием. Современные лабораторные помещения много раз проверяют данные, которые получают, прежде чем сообщить итог обратившемуся.

Диагностика ВИЧ инфекции ПЦР методом занимает один день или несколько, все зависит от загруженности персонала.

Есть некоторые желательные условия к сдающему анализ, чтобы получить максимально правдивый ответ:

  • Не есть 8-10 часов, если к этому нет противопоказаний;
  • За пару дней отказаться от алкоголя;
  • Сутки до не практиковать спортивных упражнений.

Это все, что должен сделать испытуемый. Остальное – дело медработников. Стерильность в помещении должна быть 100%, референц-лаборатории ведущих центров регулярно проверяются на предмет чистоты и исправности стерилизаторов. ПЦР применяют и для того чтобы удостовериться в диагнозе, и для подсчета вирусных частиц в крови, то есть вирусной нагрузки.

Через сколько можно сдать анализ ПЦР на ВИЧ?

Многие все же не доверяют результатам, которые получаются в первые дни после контакта с возбудителем. Анализ на ВИЧ ПЦР через какое время считается самым оптимальным? Чем больше времени проходит с момента попадания вируса в тело, тем проще его выявить. Но не следует забывать, что и лечить больного со временем все сложнее. Если достоверно известно, что был контакт с больным человеком, то не следует тянуть больше 14 дней. Если нет информации о контактах с положительными на ВИЧ людьми, то анализ нужно сдать сразу при появлении первых симптомов.

ПЦР ВИЧ на 9 неделе имеет высокую точность, но на этом сроке могут предложить и другое исследование, ИФА. Этот альтернативный анализ более дешевый, также точный, но основан на исследовании антител, которые, к сожалению, появляются не сразу после инфицирования. В идеале, для подтверждения диагноза, проводят оба анализа, сроки устанавливает врач.

Качественный ПЦР на ВИЧ дает понимание, действительно ли вирус иммунодефицита присутствует в организме. Этим же методом можно определить и другие инфекции.

Как проходит анализ на ВИЧ методом ПЦР?

Анализ на ВИЧ методом ПЦР процедура не сложная и начинается с забора венозной крови у пациента. Исследовать могут как ДНК, так и РНК, но сама процедура взятия материала будет одинаковой.

С помощью специальных реагентов, праймеров, в стерильной лаборатории проводится анализ. За единицу времени количество копий вырастает до определенных значений, эти значения оценивает сотрудник лаборатории. Проводится также определение возбудителя, чтобы установить, что речь идет о том самом вирусе. Таким образом, метод дает возможность качественного и количественного исследования биоматериала.

При каких условиях диагностика ВИЧ инфекции ПЦР методом обязательна?

Так как анализ не из дешевых, его проводят не всем и не всегда. Правда, есть ряд случаев, когда он обязателен. Донорам, к примеру, обязательно нужно сдать анализ на ВИЧ ПЦР. Также анализ проводят в случае непредвиденных аварий в медицинских учреждениях и лабораториях, и при этом есть риск контактов здоровых людей с кровью инфицированных.

В большинстве случаев исследование проводится на добровольных началах. Обязать могут только медицинских работников и, иногда, педагогов и других работников сферы образования, которые контактируют с маленькими детьми. Также основанием для принудительного обследования могут послужить признаки резкого снижения иммунитета.

Результаты анализа ПЦР на ВИЧ их точность и достоверность

Тест ПЦР на ВИЧ достоверность показывает очень высокую, до 99%. Следует напомнить, что точность зависит и от срока. На пятый день после проникновения вируса в тело, точность составляет примерно 80%. Уже к 14 дню этот показатель повышается до 98%. Далее доходит до 99%.

Практика показывает, что ложноотрицательных результатов практически не бывает, порой случаются ложноположительные. ПЦР на ВИЧ точность 99% дает вполне хорошее представление о состоянии здоровья человека, контактировавшего с ВИЧ-позитивными людьми.

Читайте также:  Как распознать ветрянку

Анализ ПЦР ВИЧ на раннем этапе дает шанс оперативно среагировать на проблему, и своевременно принять меры по продлению активной жизни. Провериться будет не лишним, если есть риск заражения.

ПЦР на ВИЧ отрицательный, что это значит?

ПЦР на ВИЧ отрицательный, как уже было сказано выше, практически не может быть ложным. В таких ситуациях врач ставит диагноз «здоров» и дальнейшее обследование не показано, если, конечно, ос временем не появится клинических симптомов заболевания.

Что делать при положительном результате анализа ПЦР при ВИЧ?

Ситуация совсем иная, когда ПЦР тест на ВИЧ дал положительный результат. В этом случае можно рассчитывать на ошибку, но, чтобы подтвердить эту гипотезу, необходимо продолжить обследование. Повторный тест и дальнейшее исследование другими методами провести нужно обязательно, и врач обязательно назначит анализы. Игнорировать требования врача нельзя.

ПЦР при ВИЧ проводится на ранних стадиях, а также иногда назначается при прохождении пациентом антиретровирусной терапии.

Перспективы теста ПЦР

Метод ПЦР в диагностической медицине можно считать перспективным, действенным и точным. Пока что единственным его минусом можно считать высокую стоимость. Исследование генетического материала вирусной частицы дает возможность с высокой точностью подтвердить или опровергнуть наличие инфекции, а также предсказать скорость развития заболевания. ДНК тест на ВИЧ, или же РНК анализ, дает точность до 99%, причем на самых ранних этапах. Раннее диагностирование ВИЧ дает огромные шансы на успешную терапию.

Результат оценивают после 14 дней с предполагаемого момента проникновения вируса, предположительно это может незащищенный половой контакт или инъекции иглой сомнительной чистоты. Отрицательный результат при анализе ПЦР можно считать достоверным, в то время как положительный подлежит дополнительной проверке.

*Если вам не повезло и анализ ПЦР на ВИЧ показывает положительный результат, не стоит отчаиваться. В настоящее время существует целый список эффективных антиретровирусных препаратов, которые способны замедлить развитие болезни и продлить жизнь на 30-40 лет.

Автор

Владимир Черкесов

Врач-гастроэнтеролог кандидат медицинских наук

Одно из самых серьезных заболеваний, которое до сих пор не научились излечивать, вызывается вирусом иммунодефицита человека.

Обнаружить возбудителя в организме непросто: в настоящее время для этого используется всего несколько исследовательских методов.

Один из таких тестов — полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Анализ ПЦР (Полимеразная цепная реакция) при ВИЧ

Чтобы понять суд метода полимеразной цепной реакции, нужно вспомнить особенность строения клеток еще из школьного курса.

Любая живая клетка содержит белок и два типа нуклеиновых кислот: ДНК и РНК. Они являются наиважнейшими клеточными структурами, поскольку содержат генетическую информацию, закодированную специальным образом.

ДНК-код представляет собой строгую последовательность микроструктур, которые образуют длинную цепочку.

Справка! В качестве основы ПЦР используется возможность нуклеиновой кислоты самостоятельно репродуцироваться.

Когда вирус проникает в здоровые клетки, он разрушает цепочки ДНК.

В этом случае клетка уже не будет содержать целостные цепочки, а лишь небольшие фрагменты — нуклеотиды. Кроме этого, даже малейшие частички вируса будут видны.

Именно на обнаружении поврежденных цепей ДНК и остаточных клеток и построен метод полимеразной цепной реакции.

При этом существует две разновидности ПЦР-диагностики:

  • Качественная. Подходит тем, у кого диагноз не подтвержден: он просто показывает, присутствует ли вирус в клетках.
  • Количественная. Пациент получает результат «ДНК вируса не обнаружено», что означает отсутствие ВИЧ, или же информация о присутствии возбудителя, что означает ВИЧ-инфицирование человека.

Если подтвержденный диагноз имеется, назначается количественный анализ. С его помощью определяется количество копий РНК (ДНК) вируса в крови (клетках). Количественный анализ позволяет оценить эффективность лечения у ВИЧ-инфицированных, определить выраженность заболевания, его прогрессирование.

Какие методы диагностики позволяют выявить ВИЧ-инфекцию рассказывается на видео:

Преимущества и недостатки этого метода диагностики

Как и любое диагностическое мероприятие, ПЦР имеет свои плюсы и минусы.

К преимуществам метода относят:

  • Высокая достоверность. При ПЦР удается обнаружить мельчайшие остатки вируса, вероятность обнаружения возбудителя достигает 80% через 4-5 дней после заражения, 100% — через 14 дней после заражения. Так, наибольшая точность достигается при изучении ДНК вируса в клетках крови: можно выявить вирус при его количестве 1-5 копий на 1 миллион клеток.
  • Возможность использовать различный биоматериал (для ПЦР не подходит слюна, моча, пот и слезы, но может использоваться кровь, сперма и половые выделения у женщин).
  • Возможность проведения анализа на разные заболевания по одной пробе. При помощи ПЦР можно обнаружить ВИЧ, хламидии, герпес, цитомегаловирус, уреаплазму, микоплазму, гонорею, трихомониаз, токсоплазмоз.
  • Быстрая скорость получения результатов. Существует экспресс-обследование ПЦР, позволяющая узнать результаты диагностики уже через несколько часов.
  • Высокая чувствительность: ПЦР, в отличие от, например, ИФА, помогает обнаружить вирус уже на первых неделях после заражения.
  • Возможность получения результатов уже через несколько дней после заражения. При инфицировании определить вирус можно через 5-14 дней, тогда как ИФА целесообразно проводить только через 6 недель.
  • Отсутствие возрастных ограничений. ПЦР допустимо проводить и у взрослых, и у детей с момента рождения.

Главной особенностью ПЦР-анализа является то, что он выявляет не антитела к вирусу, а сам вирус.

Против преимуществ выступает всего несколько недостатков:

  • Дороговизна.
  • Вероятность получения ложноположительных результатов — около 20%. Обычно это случается по вине персонала (ошибки при заборе или транспортировке биоматериала, при изучении биоматериала и расшифровке результатов).
  • Необходимость применения передового высокого технологичного оборудования, которым снабжены лишь некоторые клиники.

Внимание! Очевидно, что достоинств у методики гораздо больше, чем недостатков. Особенно важно, что при помощи ПЦР можно выявить заболевание на начальном этапе развития и вовремя начать лечение.

Результат анализа ПЦР может быть положительным уже спустя 14-21 день после возможного инфицирования. Но если анализ отрицательный, это не гарантирует отсутствие инфекции. Лучше провести подтверждающий тест медом ИФА через 2 недели.

Читайте также:  М эхо толщина норма

О том, как проводится анализ ПЦР на ВИЧ рассказывается на видео:

Кому назначается?

В первую очередь, ПЦР назначается при подозрении на ВИЧ. Методика также может быть показательной для выявления заболеваний, передаваемых половым путем, наследственных заболеваний.

Справка! ПЦР-диагностика часто проводится по инициативе человека, у которого не проявились симптомы заболевания, однако есть предположение и беспокойство о возможном заражении, например, после незащищенного полового акта, недавнего переливания крови, контакта с зараженным человеком.

Кому еще показано проведение обследования?

  • Людям, у которых анализ ИФА дважды оказался положительным. ПЦР позволит установить окончательный диагноз.
  • Донорам, планирующим сдать кровь.
  • Людям, у которых иммуноблоттинг подтвердил диагноз. Иммунный блоттинг — метод диагностики СПИДа, и обычно его проводят совместно с ПЦР.
  • Людям, находящимся на этапе лечения заболеваний, вызванных ВИЧ. ПЦР позволяет оценить эффективность терапии.
  • Новорожденным, мать которых ВИЧ-положительна (передача вируса происходит примерно в 30% случаев). Уже через 2-3 недели после рождения можно определить, произошло ли заражение.

Некоторые люди проходят обследование в профилактических целях, однако это случается нечасто, поскольку стоимость ПЦР-исследования высока.

Сколько времени делается анализ и где можно его сдать?

Анализ ПЦР на ВИЧ проводится в лабораторных условиях.

Сам забор крови производится за 5-10 минут, а уже на следующий день результаты оказываются готовы.

При выборе экспресс-диагностики (например, в лабораториях «Инвитро» или «Гемотест») расшифровка результатов специалистом занимает всего 2 часа.

В частных клиниках диагностику, по желанию, можно пройти анонимно. Для этого нужно сообщить об этом при личном визите: каждому пациенту присваивается порядковый номер и дается доступ к личному кабинету. Тогда человек может узнать результаты даже без повторного визита в лабораторию.

О достоверности результатов ПЦР исследования рассказывается на видео:

Стоимость исследования

ПЦР-диагностика не из дешевых, поскольку требует наличие определенного передового оборудования, а также особых знаний специалиста.

Оборудование есть лишь в некоторых медицинских лабораториях, что позволяет устанавливать высокую стоимость анализа.

Средняя цена исследования — 3000-5000 рублей. В некоторых регионах стоимость не превышает 1500-2000 рублей.

Поскольку существует вероятность ложноположительных и ложноотрицательных результатов, или же человек обратился с запросом слишком рано (вирус еще не нарушил структуру ДНК, но уже присутствует в организме), может потребоваться повторное исследование.

Высокая стоимость обусловлена и тем, что для диагностики требуется ряд компонентов:

  1. Отрезок ДНК (матрица), предназначенный для амплификации;
  2. Два праймера;
  3. Полимераза — химически активный компонент, который ускоряет увеличение количества вирусных частиц в геометрической прогрессии;
  4. Дезоксирибонуклеозидтрифосфаты;
  5. Заряженные частицы двухвалентного магния;
  6. Специальный раствор, в котором осуществляется процесс полимеризации. Этот раствор предназначен для поддержания подходящего уровня кислотности, концентрации солей, количества магния в жидкости.

Также при исследовании требуется небольшое количество вазелина: он содержит жиры и при высокой температуре закипает, что защищает изучаемый образец от перегрева.

Проведение анализа

Для проведения анализа подходит кровь, сперма и влагалищные выделения. Как правило, чаще используют венозную кровь.

Забор крови производится утром натощак.

Кроме этого, к анализу нужно подготовиться:

  • За 2-3 дня до диагностики следует исключить из рациона жирные продукты.
  • За 1-2 суток до анализа исключается алкоголь.
  • За 2 недели до анализа нужно прекратить прием иммуностимулирующих препаратов.
  • Последний прием пищи должен произойти не позднее, чем за 8 часов до сдачи крови.

При заборе крови из вены внутренний сгиб локтя обрабатывается специальным раствором, после чего специалист прокалывает кожу, помещает иглу шприца вены и забирает нужное количество крови. Затем игла изымается, место снова обрабатывается спиртовым средством, пациенту выдается ватка.

Пациент должен на время согнуть руку, чтобы кровь остановилась. Если человек чувствует себя хорошо, он сразу может идти домой. При головокружении, тошноте и обмороке ему оказывают первую помощь.

Полученный биоматериал лаборант помещает в стерильную колбу и отправляет на диагностику. Специалист смешивает расщепленный биологический материал в особом реакторе с ферментами, синтезирующими различные инфекции.

Если в крови присутствует очень мало частиц вируса, при взаимодействии с ферментами их количество резко возрастает: реактивы объединяются с ДНК вируса и дублируют ее.

Анализ производится в несколько этапов, поскольку деление молекул происходит в геометрической прогрессии. Из одной клетки получается 2, из 2 — 4 и так далее.

Анализируя мнение и отзывы докторов, можно с уверенностью сказать: в настоящее время ПЦР-диагностика является наиболее точным методом исследования на ВИЧ-инфекцию.

Справка! С помощью анализа можно установить присутствие вируса в организме уже через несколько дней после заражения, даже если количество вирусных структур составляет всего 1-5 единиц на миллион клеток. Однако не стоит забывать о недостатках метода, например, вероятности получения ложноположительных результатов.

Тем не менее, ПЦР остается одним из немногих анализов, которые позволяют вовремя диагностировать заболевание и приступить к лечению.

Комментировать
0 просмотров
Комментариев нет, будьте первым кто его оставит

Это интересно
No Image Венерология
0 комментариев
No Image Венерология
0 комментариев
No Image Венерология
0 комментариев
No Image Венерология
0 комментариев
Adblock detector